Polymerase chain reaction - PCR

OTTIMIZZAZIONE DELLA PCR
 

COMPONENTE	MIN	STANDARD	MAX
DNA	<1 pg	0.1 - 1 mcg	>1 mcg
Primers  mcM	0.1	0.2 - 0.5	1 - 2
Primers ng	30	60 - 150	300 - 600
Primers pm	5	10 - 25	50 - 100
Ciascun dNTP mcM	2-20	50 - 200	200
Mg mM	0.5	1.5	2.5 - 4
Enzima U/100 mcL	1	2.5	5
N cicli	20-25	30-40	45-50

Elettroforesi su gel di agarosio: (Marcatore)

PCR

RT-PCR IIb - RT-PCR MPL/NBL

RT-PCR MPL e B2M

Esercitazione

Si consiglia la lettura del libro di Paul  Rabinow :
"Fare scienza oggi - PCR: un caso esemplare di industria biotecnologica", Feltrinelli, 1999.

DNA